Ферритин як маркер залізодефіцитної анемії та пухлинний маркер

Ферритин як маркер залізодефіцитної анемії та пухлинний маркер

Автор: Андрєєв Г. І. магістр техніки і технології, випускник (2003 рік) СПбДПУ, факультет медичної фізики та біоінженерії, кафедра фізико-хімічних основ медицини.

Залізодефіцитною анемією (ЗДА) і прихованими формами дефіциту заліза страждає 50-80% населення Росії. Визначення концентрації феритину в сироватці крові дозволяє ефективно диференціювати ЗДА від інших типів анемій. Крім того, високі концентрації феритину характерні для запальних і інфекційних процесів, деяких онкологічних захворювань.

У статті описані структура і функції феритину, його роль в метаболізмі заліза, характерні для різних станів зміни його концентрації в крові, даний порівняльний аналіз характеристик ІФА-наборів зарубіжних виробників і першої російської тест-системи.

Іони заліза виконують в організмі людини дуже важливу функцію. Вони входять до складу білків, які здійснюють перенесення кисню, цитохромів та железосеропротеінов, залізовмісних ферментів. Тому недолік заліза в організмі призводить до багатьох негативних наслідків. Одним з них є розвиток залізодефіцитної анемії (ЗДА). Згідно з даними ВООЗ, від прихованого дефіциту заліза і ЗДА страждає близько однієї третини населення планети. У деяких регіонах Росії цей показник досягає 70-80%. Прояви цього захворювання різноманітні і іноді призводять до тяжких наслідків.

Надлишковий вміст заліза в організмі також небезпечно. Воно призводить до розвитку токсикозів, патологічного підвищення рівня активних форм кисню.

Внаслідок цього важливо мати інтегральний показник оцінки вмісту заліза в організмі. Високоінформативним маркером, що характеризує метаболізм заліза, є феритин.

Для визначення вмісту феритину в сироватці крові використовуються іммунометріческіе методи. У зв'язку з полівалентністю даного антигену можна створити специфічні і високочутливі системи визначення його концентрації. У Росії в даний час визначення феритину в лабораторній практиці поширено дуже слабо. Це пояснюється недостатньою поінформованістю населення та медичного персоналу про діагностичної значущості даного показника, а також порівняно високою вартістю проведення аналізу за допомогою наборів реагентів зарубіжних виробників.Перша в нашій країні імуноферментна система для визначення концентрації феритину в сироватці крові людини, заснована на застосуванні моноклональних антитіл, розроблена в аналітичній лабораторії компанії «Алкор Біо» . Для успішного застосування в лабораторній практиці створюваний продукт повинен відповідати всім вимогам до його якості, не поступатися за аналітичними характеристиками зарубіжним аналогам, а також володіти вартістю, що забезпечує можливість проведення регулярних скринінгових обстежень.

1. Актуальність проблеми

Ферритин — розчинний у воді комплекс гідроксіфосфата заліза з білком апоферрітіном. Найбільша його кількість знаходиться в клітинах печінки, селезінки, кісткового мозку та ретикулоцитах, де найбільш інтенсивно проходять процеси синтезу, дозрівання і деградації еритроцитів і феритин активно бере участь в метаболізмі та перерозподіл заліза в організмі.

У хребетних захист від токсичного ефекту заліза і активних форм кисню здійснюється двома залізозв'язуючих білками: позаклітинними трансферинами і внутрішньоклітинними феритину. Обидва зберігають залізо в безпечній окисленої формі Fe (III), яка не каталізує продукцію вільних радикалів. Ферритин містить 15-20% загальної кількості заліза в організмі.

Концентрація феритину в сироватці крові дозволяє оцінити загальні запаси заліза в організмі [1]. У здорових людей вміст феритину в плазмі крові становить 20-350 нг / мл. Падіння концентрації нижче 10 нг / мл свідчить про розвиток залізодефіцитної анемії, в той час як при надмірному накопиченні заліза концентрація феритину може зростати до декількох тисяч нг / мл.

Залізодефіцитна анемія є найпоширенішим анемічним синдромом і становить приблизно 80% захворюваності всіма видами анемій. Її поширеність визначається фізіологічними, патологічними, екологічними і соціальними чинниками. Припускають, що в світі страждає залізодефіцитною анемією близько 1,8 мільярда чоловік (ВООЗ, 1998). Згідно з даними ВООЗ (1992), дефіцит заліза визначається як мінімум у 20-25% всіх немовлят, у 43% дітей у віці до 4 років і 37% дітей від 5 до 12 років. Навіть в розвинутих країнах ці цифри не нижче 12% у дітей до 4 років і 7% дітей у віці від 5 до 12 років [2].

Через фізіологічних щомісячних крововтрат і виношування дітей більш ніж у 51% жінок дітородного віку в усьому світі виявляється брак заліза аж до відсутності його запасів. Дефіцит заліза в III триместрі вагітності виявляється майже у 90% жінок і зберігається після пологів і лактації у 55% ​​з них [2].

У Росії частота залізодефіцитної анемії наближається до показника країн третього світу. У деяких регіонах Росії (Північ, Східний Сибір, Північний Кавказ) прихований дефіцит заліза виявляється у 70-80% жителів. Це пов'язано і з несприятливою екологічною обстановкою, і з нераціональним харчуванням, викликаним зниженням рівня життя.

Негативні прояви даного захворювання різноманітні і важко стерпні. Це синдром хронічної втоми, раптова втрата свідомості, порушення менструального циклу, дизуричні розлади, перекручення смакових відчуттів, порушення психіки. ЗДА є обтяжливим фактором при захворюваннях серцево-судинної і травної систем. У дітей анемії часто є причиною уповільнення розумового і фізичного розвитку, зниження успішності. Дорослі страждають від м'язової слабкості, тривалої ремісії після перенесених інфекцій, що призводить до економічних втрат. Удавана дивина, несерйозність симптомів (сонливість, швидка стомлюваність) змушують людей довгий час не звертатися до лікаря з чіткими скаргами, а пристосовуватися до хвороби. Патологія ж прогресує і в підсумку може призвести до серйозних, часом незворотних порушень функцій організму. Так, анемії є частою причиною внутрішньоутробної смерті плода, низької ваги новонароджених, вони обумовлюють до 20% материнських смертей [3].

В даний час загальноприйнято, що діагноз залізодефіцитних станів треба ставити до розвитку повної картини захворювання, тобто до виникнення гіпохромною анемії. При дефіциті заліза страждає весь організм, а гіпохромна анемія — це пізня стадія хвороби.

У 1983 р П. М. Альперін і Ю. Г. Митерев запропонували нову класифікацію форм залізодефіцитної анемії, яка в повній мірі відображає всі основні етіологічні фактори, що призводять її до розвитку. Вони виділяють:

  • постгеморрагические анемії;
  • нутритивні (аліментарні) анемії;
  • анемії при підвищеній витраті заліза в організмі (наприклад, при вагітності, лактації, рості і дозріванні);
  • залізодефіцитні анемії при початково недостатньому рівні заліза;
  • залізодефіцитні анемії при його недостатній розробці (наприклад, постгастрорезекціонние, агастральние, анентеральние);
  • при перерозподілі заліза в результаті інфекції, при запальних і пухлинних процесах;
  • при порушенні транспорту заліза (наприклад, гіпотрансферрінеміческіе і атрансферрінеміческіе).

Регулярне визначення феритину використовується для відстеження швидкого виснаження запасів заліза під час вагітності, у донорів крові та у пацієнтів, регулярно піддаються гемодіалізу. Воно також має цінність для діагностики гемохроматоз, при моніторингу пацієнтів, які регулярно піддаються переливання крові або железозаместітельной терапії і становлять групу ризику щодо акумулювання надлишкових запасів заліза. Концентрація феритину може підвищуватися при деяких гострих і хронічних захворюваннях печінки, при голодуванні і виснаженні, наявності запальних процесів, інфаркті міокарда. Можна використовувати визначення феритину для діагностики і моніторингу онкологічних захворювань.

Показники обміну заліза в нормі і при різних видах анемій (Авцин А. П. 1990).

Показники метаболізму заліза

До сучасних методів ранньої діагностики залізодефіцитних станів (гіпосідероза) відносяться визначення концентрації заліза в сироватці, загальної залізозв'язувальної здатності сироватки (ОЖСС), трансферину і феритину в сироватці. Показники метаболізму заліза при різних видах анемій представлені в Таблиці 1.

Надлишковий вміст заліза в організмі називають сидероз або гіперсідероза. У 1971 р Dagg e. a. запропонували клінічну класифікацію гіперсідероза. Розрізняють такі форми гіперсідероза:

  • паренхіматозні форми (з переважним відкладенням заліза в клітинах паренхіми печінки). До них відносяться: первинний спадковий гемохроматоз, сидероз при деяких видах цирозу печінки, вторинний сидероз при портокавальном анастомозі, сидероз при вродженої атрансферрінеміі;
  • "Ретикулоендотеліальна" форми, до яких відносяться: генералізовані відкладення заліза при хронічних рефрактерних (до специфічного лікування) анеміях, гемолітичних анеміях, багаторазових гемотрансфузіях, при надмірному парентеральномувведенні заліза, сидероз банту;
  • локальні форми: ідіопатичний гемосидероз легенів, легенево-нирковий синдром Гудпасчера і гемосидероз ниркового походження при нічній пароксизмальної гемоглобинурии.

При цих патологічних станах концентрація феритину в плазмі крові підвищена внаслідок порушення балансу обміну заліза.

У той час як виснаження запасів заліза в організмі є єдиною причиною зниження рівня сироваткового феритину, підвищення рівня феритину спостерігається не тільки при надлишку запасів заліза, але також в деяких інших ситуаціях.

Визначення феритину можна використовувати для діагностики і моніторингу ряду онкологічних захворювань. Цінність визначення феритину як онкомаркера підтверджують багато досліджень [4]. [5].

Високі концентрації феритину виявляються в сироватці пацієнтів з карциномою підшлункової залози, рак легенів, гепатомой і нейробластомою, гострий мієлобластний і лімфобластний лейкоз, лімфогранулематоз (хвороби Ходжкіна). Концентрація сироваткового феритину звичайно підвищена при метастазуючому раку молочної залози. При онкологічних захворюваннях концентрація феритину в крові підвищена як внаслідок його активної секреції, так і за рахунок підвищеного розпаду клітин і вивільнення цитоплазматичного феритину, наприклад, при хіміотерапії. Після успішного лікування концентрація феритину в сироватці крові знижується.

Концентрація феритину може також підвищуватися при деяких гострих і хронічних захворюваннях печінки (наприклад, алкогольне ураження, гепатит), при голодуванні і виснаженні, запальних захворюваннях (легеневі інфекції, остеомієліт, хронічні інфекції сечових шляхів, ревматоїдний артрит, системний червоний вовчак, опікова хвороба), інфаркті міокарда [5, [6]. У цих випадках основною причиною збільшення вмісту феритину в крові є некроз клітин і вивільнення внутрішньоклітинної фракції.

Визначення феритину в клінічній практиці дозволяє поліпшити діагностику порушень метаболізму заліза. Безперечними перевагами методу є також мала інвазивність і простота виконання. Однак правильна інтерпретація результатів вимагає ясного розуміння як процесів метаболізму заліза, так і обліку інших впливають на рівень сироваткового феритину факторів, наприклад ураження печінки або запальних процесів.

В даний час багато зарубіжних виробників пропонують набори реагентів для імуноферментного визначення вмісту феритину в сироватці, однак вони дуже мало поширені в Росії внаслідок високої вартості і недостатню інформованість як медиків, так і населення про діагностичної значущості даного показника. Таким чином, необхідність розробки вітчизняної тест-системи для визначення концентрації феритину в крові людини очевидна.

3. Структура і функція молекули феритину.

Молекула феритину утворена Н-і L- типами субодиниць (Н — heavy і L — light), У людини амінокислотні послідовності Н і L ідентичні на 54%. Поліпептидний ланцюг Н-типу людини складається з 183 амінокислотних залишків, її молекулярна маса 21 кДа. Молекулярна маса L-субодиниці, що складається з 175 амінокислот, близько 19 кДа.

Кожна молекула апоферитин зібрана з 24 структурно рівнозначних субодиниць, що вносять однаковий внесок у формування четвертинної структури. У 24-заходи змішаного складу (гетрополімерах) Н і L- субодиниці мають однакову конформацію, надаючи можливість формування гетерополімера з будь-якої з можливих композицією субодиниць.

Субодиниці організовані таким чином, щоб утворити порожню, симетричну глобулу з зовнішнім і внутрішнім діаметрами 125 і 80 ангстрем відповідно [7]. [8] (Малюнок 1).

Малюнок 1. Четвертичная структура молекули феритину.

Найближчі до глядача субодиниці зображені товстими стрічками, всередині глобули в центрі видно залізовмісні ядро.

Молекули феритину можуть утворювати суперолігомери — димери і тетрамери [9].

Субодиниці щільно упаковані, за винятком того, що в місцях контакту трьох субодиниць є вузькі канали діаметром близько 1 нм, що пронизують глобулу. Ці канали, що проходять уздовж осей третинної симетрії, є головним вхідним шляхом для заліза і сайтами окислення Fe (II) [10].

Всі молекули феритину мають порожнина для зберігання заліза. Вважають, що головним фактором, що визначає формування ядра, є розподіл зарядів на внутрішній поверхні.

Феритину, ізольовані з тканин ссавців, складаються з суміші ізоферрітінов з широким спектром складу субодиниць і вмісту заліза [11]. [12]. Можливі 25 ізоферрітінов з співвідношенням субодиниць: Н24 L0. H23 L1. H22 L2 … H0 L24. але в основному спектр розподілу субодиниць в ізоферрітінах укладений в межах H22 L2 — Н2 L22. Зазвичай феритину з переважанням L-субодиниць характерні для органів, що запасають залізо (печінка і селезінка), і ці феритину зазвичай мають відносно високий середній рівень вмісту заліза (більше 1500 атомів Fe на молекулу). Багаті Н-субодиницями феритину, характерні для серця і мозку, мають низький вміст заліза (менше 1000 атомів Fe на молекулу).

Через розбіжності щодо складу субодиниць молекулярна маса ізоферрітінов коливається від 440 кДа у легких фракцій ізоферрітінов селезінки до 500 кДа у важких м'язових феритину. Загальна молекулярна маса феритину може подвоюватися за рахунок включення кластера заліза і досягати 900 кДа [13]. Однак феритину зазвичай не повністю насичені залізом і володіють молекулярною масою, проміжною між апоферрітіном і повністю заповненим холоферрітіном.

Субодиниці феритину містять невелику кількість вуглеводнів. Склад і кількість цукрів сильно варіюють в залежності від тканинної приналежності, і становить 2,4% маси апоферрітіном печінки і селезінки і близько 5% у серцевих ізоформ [14].

Ферритин виконує в організмі подвійну функцію. Він запасає в клітинах розчинне залізо, яке при необхідності може бути легко задіяно для синтезу різних речовин. У той же час ферритин захищає організм від токсичної дії іонів металів. Крім заліза феритин здатний зв'язувати і інші іони, деякі з яких токсичні (алюміній, берилій).

Відомо, що зв'язування заліза трансферину і ферритином вимагає попереднього зміни ступеня окислення металу від +2 до +3, а його вивільнення з цих молекул супроводжується зворотним процесом відновлення. Найважливішу роль в цих процесах відіграють також низькомолекулярні хелатирующие з'єднання. Вони є необхідним проміжним ланкою в перенесенні заліза від транспортних і депонуються білків до місць утилізації заліза.

4. Ферритин в циркуляторном руслі

Перше пряме свідчення присутності феритину в сироватці крові отримали Reissman і Dietrich в 1956 р [15]. Спочатку ферритин був знайдений в сироватці пацієнтів з некрозом печінки і перевантаженням залізом, проте після розвитку чутливого іммунорадіометріческого аналізу його вдалося виявити і в нормальній сироватці [16].

Позаклітинні феритину, знайдені в сироватці і біологічних рідинах, складають меншу частину від загального феритину. Плазматичний ферритин має низький вміст заліза (0,02-0,07 мкг Fe на мкг білка в порівнянні з більш 0,7 мкг Fe на мкг білка в печінці і селезінці).

Джерело і механізм продукції плазматичного феритину досі багато в чому неясний. Частина циркулюючого феритину виділяється з руйнуються тканин, наприклад при цирозі печінки, інфаркті міокарда. Однак наявність в молекулі специфічно глікозильованих субодиниць і тонка регуляція кількості феритину в крові відповідно до рівня заліза в нормі і при різних патологічних процесах показує, що головним джерелом плазматичного феритину є його активна секреція. Зокрема, секреція виконується фагоцитами, які здійснюють деградацію гемоглобіну. При цьому ферритин виконує функцію транспорту заліза від клітин ретикулоендотеліальної системи до гепатоцитах, які синтезують гемоглобін de novo.

Місця синтезу феритину, що підлягає секреції, і тканинного феритину також різні. Показано, що секреторний білок синтезується на полірібосомамі, пов'язаних з мембранами ендоплазматичної, де здійснюється подальший процесинг молекули, включаючи гликозилирование. Синтез феритину, секреція яких не передбачена, протікає на вільних цитоплазматичних рибосомах [17].

Припущення, що секретуються феритину функціонально активні, засноване на ідентифікації специфічних рецепторів на різних клітинних мембранах. Такі рецептори були описані на клітинах печінки, лімфоцитах і еритробластах людини. До теперішнього часу неясно, скільки типів рецепторів існує, але головне очевидна відмінність знайдено між ними на клітинах печінки та інших типах клітин. Рецептори печінки володіють специфічністю з урахуванням співвідношення Н і L-субодиниць, в той час як лімфоцитарні рецептори специфічні до Н-ланцюги.

Хоча багато тканинні ізоферрітіни можуть вивільнятися в плазму, виявлені чіткі відмінності в динаміці циркуляції тканинного і плазматичного феритину. Так, швидкість видалення з плазми тканинних феритину дуже висока (період напіввиведення Т1/2 становить приблизно 9 хв), в той час як кількість ін'єктувати міченого плазматичного феритину зменшувалася на 50% лише через 30 годин.У нормі в плазмі здатні накопичуватися ізоформи L24 і глікозильовані молекули, багаті L-субодиницями, але містять мало заліза [18].

Значне збільшення вмісту характерних для пухлинних клітин фракцій феритину з підвищеною кількістю Н-субодиниць може бути наслідком декількох причин:

  • інтенсивного некрозу пухлинної тканини через недостатність трофіки швидко зростаючої пухлини;
  • ефективної протиракової терапії, що призводить до прямого вивільненню цитозольного феритину;
  • активного синтезу і секреції специфічних пухлинних форм феритину;
  • патологічного перерозподілу заліза з його накопиченням в клітинах ретикулоендотеліальної системи;
  • змін функціонування печінки, що призводять до порушення циркуляції феритину.

Взаємозв'язок плазматического феритину з багатьма фізіологічним процесами в організмі дозволяє віднести його до білків гострої фази і до пухлинних маркерів.

5. Зміст феритину в сироватці крові

Таблиця 2. Зміст феритину в сироватці крові в нормі.

У перший місяць після народження концентрація феритину підвищена у зв'язку переходом від фетальної форми гемоглобіну до дорослого.

Зміст феритину в плазмі у жінок репродуктивного віку значно менше, ніж у чоловіків. Це пов'язано з щомісячними фізіологічними кровопотерями, а також з дітонародженням. За весь період вагітності додатково витрачається близько 1 г заліза, що явно простежується в прогресивному зниженні феритину в крові. У третьому триместрі вагітності концентрація феритину мінімальна і межує зі значеннями, характерними для ЗДА. Лактація також супроводжується підвищеною витратою заліза, так як молочна залоза продукує білок з подібними трансферрину властивостями — лактоферрин.

У постменопаузі вміст заліза і концентрація феритину в організмі жінок зростають, наближаючись до показників у чоловіків [19].

У разі перевантаження організму залізом концентрація феритину перевищує 400-500 нг / мл, а при яскраво вираженому гемохроматозі може досягати 10 000 нг / мл і більше.

Незважаючи на низький вміст заліза в плазматичних ферритине, концентрація феритину в плазмі корелює як з резервними запасами заліза в організмі, так і його загальною кількістю. Визначаючи в сироватці крові вміст феритину, насправді ми визначаємо концентрацію білкової частини комплексу, апоферитин.Концентрація апоферитин в крові відповідає загальному рівню феритину в тканинах і, отже, утримання запасів заліза.

Дане твердження підтверджується численними дослідами [20]. [21]. Для здорових осіб був запропонований фактор еквівалентності (коефіцієнт перерахунку): 1 нг феритину в 1 мл сироватки відповідає 8 мг (143 мкмоль) заліза, що зберігається в депо.

Таким чином, діагностична цінність вимірювання сироваткового феритину незаперечна.

6. Імунологічні властивості феритину

В даний час для вимірювання концентрації феритину в сироватці крові використовуються імунологічні методи аналізу. Для правильного визначення досліджуваного антигену необхідно використовувати високоспецифічні до аналізованого речовини антитіла. Правильний вибір антитіл можна зробити, знаючи особливості антигенного будови феритину.

Ферритин являє собою складний білок з вираженою четвертинної структурою (див. Розділ 3.). Внаслідок цього більшість антигенних детермінант на його поверхні є конформационно залежними. У літературі описані специфічність і афінність широкого кола як поліклональних, так і моноклональних антитіл до феритину. Показано, що антитіла володіють специфічністю в міжтканинному відношенні. Так, в залежності від відносного вмісту в молекулі Н-і L-субодиниць антитіла виявляють різне спорідненість до феритину. Наприклад, в роботі [22] при використанні в якості іммуногена феритину з печінки людини перехресна реактивність отриманих моноклональних антитіл з селезінковими ферритином становила 74%, а з серцевим ферритином — всього 13%.

Білкова оболонка, позбавлена ​​кластеру заліза, проявляє велику імунологічну активність в порівнянні з ферритином, навантаженим залізом. Ймовірно, це викликано підвищенням конформаційної лабільності молекули, що сприяє залученню у взаємодію з антитілами ділянок, які будуть недоступні або малодоступних в нативної молекулі. Адсорбція апоферитин на полістиролі приводила до практично повної втрати імунологічної реактивності, що також вказує на конформаційний характер епітопів молекули [23].

Антитіла до одиночних субодиницям феритину виявили істотні відмінності в їх антигенному будові. Антигенні детермінанти Н і L-субодиниць феритину відрізняються один від одного.

Із загальної кількості кластерів епітопів, максимальна кількість яких обмежена числом субодиниць феритину (24) тільки 3-4 доступні для одночасного зв'язування антитіл. Даний висновок про максимальну валентності феритину зроблений в роботі [24] на підставі геометричних розрахунків за відомим зовнішнім діаметром сферичної глобули феритину (12-13 нм) і мінімального відстані між центрами двох молекул антитіл, здатними розташуватися на антигенну поверхні без стеричних утруднень (12-14 нм).

Визначення концентрації феритину в сироватці крові спочатку здійснювалося радіоімунологічними методами, заснованими на конкуренції за зв'язування з антитілами антигену з сироватки крові і його радіоактивно міченого аналога [25]. Дещо пізніше почали застосовувати неконкурентний іммунорадіометріческій метод, який використовує можливість одночасного зв'язування з молекулою феритину двох молекул антитіл [26].

Особливістю феритину є наявність декількох сайтів зв'язування антитіл, деякі з них повторюються. Як було сказано вище, в цілому кулька має розміри, достатні для одночасного зв'язування з чотирма молекулами антитіл. Тому для виявлення феритину в основному використовують неконкурентний спосіб аналізу. Даний вибір пов'язаний не тільки зі складністю кон'югированія феритину з міткою і можливістю порушення при цьому його антигенної структури, а й з необхідністю забезпечення високої чутливості аналізу для виявлення ЗДА, недосяжною при конкурентній схемою.

Застосування моноклональних антитіл з різною епітопной спрямованістю для зв'язування і детекції антигену робить можливим проведення імунологічної реакції в одну стадію, при цьому відсутня конкуренція між "верхніми" і "нижніми" антитілами за зв'язування з загальними епітопами, що спотворює результати аналізу. Проведення аналізу в одну стадію дозволяє знизити витрати реагентів і вартість аналізу, зменшити зайнятість лабораторного обладнання і значно заощадити робочий час.

7. Основні характеристики імуноферментних тест-систем для кількісного визначення феритину

В даний час практично всі пропоновані тест-системи засновані на неконкурентном методі визначення феритину.Однак використовувані різними виробниками антитіла, поверхню твердої фази, способи детекції сигналу та інші параметри різняться дуже значно.

Результати порівняння аналітичних характеристик тест-систем виробництва різних фірм наведені в Таблиці 3.

Таблиця 3. Аналітичні характеристики наборів для визначення феритину різних виробників.

Розроблений компанією "Алкор Біо" набір "ІФА-феритин" представляє собою гетерогенну імуноферментну систему для кількісного визначення феритину в сироватці крові людини. Основними компонентами такої системи є тверда фаза, кон'югат антитіла з міткою і калібрувальні проби.

З таблиць 3 і 4 видно, що "ІФА-феритин" за своїми характеристиками перевершує багато із зарубіжних аналогів. Вартість одиничного визначення феритину набором DPC "Immulite" трохи нижче, проте слід враховувати, що вартість необхідного для цього автоматичного аналізатора приблизно в 5 разів вище, ніж вартість обладнання, на якому проводиться визначення феритину набором "ІФА-феритин".

Список літератури.

[1]. Bezwoda WR et al. The relationship between marrow iron stores, plasma ferritin concentrations and iron absorption, Scand J Haematol. 1979; 22: 113-20.

[2]. Complementary Feeding And The Control Of Iron Deficiency Anemia In The Newly Independent States Presentation By WHO At A WHO / Unicef ​​Consultation Geneva, Switzerland 4 February (http://www.cdc.gov/mmwr/distrnds.html).

[3]. 1999 Report of the UNICEF / WHO Regional Consultation Prevention and Control of Iron Deficiency Anemia in Women and Children. 3-5 February 1999 року, Geneva, Switzerland (http://www.who.int/nut/ida.htm).

[4]. Grail A, Hancock BW, Harrison P. Serum ferritin in normal individuals and in patients with malignant lymphoma and chronic renal failure measured with seven different commercial immunoassay techniques. J Clin Pathol 1982; 35: 1204-1212.

[5]. Milman N, Pedersen L. The serum ferritin concentration is a significant prognostic indicator of survival in primary lung cancer. Oncology reports, 2002; 9: 193-198.

[6] .Назаренко ГІ, Кишкун АА. Клінічна оцінка результатів лабораторних досліджень. М. Медицина, 2000., 544с.

[7]. Harrison PM, Arosio P. The ferritins: molecular properties, iron storage function and cellular regulation. Biochimica et Biophysica Acta. 1996; 1275: 161-203.

[8]. Munro HN, Linder MC. Ferritin structure, biosynthesis, and function. Physiological Reviews. 1978; 58: 317-396.

[9]. Gerl M, Jaenicke R. Self-assembly of apoferritin from horse spleen after reversible chemical modification with 2,3-dimethylmaleic anhydride. Biochemistry. 1988; 27: 4089-4097.

[10]. Harrison PM, Treffry A, Lilley TH. Ferritin as an iron-storage protein: mechanisms of iron uptake. J. Inorg. Biochemistry. 1986; 27: 287 — 293.

[11]. Arosio P, Adelman TG, Drysdale JW. On ferritin heterogeneity. Further evidence for heteropolymers. J. Biol. Chemistry. 1978; 253: 4451-4458.

[12]. Ruggieri G, Iacobello C, Albertini A, Brocchi E, Levi S, Gabri E, Arosio P. in Ferritins and Isoferritins as Biochemical Markers (Albertini A, Arosio P, Drysdale JW, eds). 1984; pp. 67-78, Elsevier, Amsterdam.

[13]. Stefanini S, Chiancone E, Arosio P, Antonini E. Structural heterogeneity and subunit composition of horse ferritin. Biochemistry. 1982; 21: 2293-2299.

[14]. Shinjyo S, Abe H, and Masuda M. Carbohydrate composition of horse spleen ferritin. Biochim Biophys Acta, Nov 1975; 411: 165-167.

[15]. Reissman KR, Dietrich MR. On the presence of ferritin in the peripheral blood of patients with hepatocellular disease. J. of clinical investigation. 1956; 35: 588-595.

[16]. Addison GM, Beamish MR, Hales CN, Llewellyn P. An immunoradiometric assay for ferritin in the serum of normal subjects and patients with iron deficiency and iron overload. J. of Clin. Pathol. 1972; 25: 326-329.

[17]. White K, Munro HN. Induction of ferritin subunit synthesis by iron is regulated at both the transcriptional and translational levels. J. Biol.Chem. 1988; 263: 8938-8942.

[18]. Cragg SJ, Covell AM, Burch A, Worwood M. Turnover of 131 I-human spleen ferritin in plasma. British J. of Haematology. 1983; 55: 83-92.

[19]. Yamashita N, Oba K, Nakano H, and Metori S. Age-related changes in concentrations of ferritin, glycosylated ferritin, and non-glycosylated ferritin. Nippon Ronen Igakkai Zasshi. 1996; 33: 754-760.

[20]. Lipschitz DA, Cook JD, Finch CA, A clinical evaluation of serum ferritin as an index of iron stores. The New Engl J of Medicine, 1974, 290, 22, 1213-1216.

[21]. Jacobs A, Miller F, Worwood M, et al. Ferritin in serum of normal subjects and patients with iron deficiency and iron overload. Br Med J. 1972; 4: 206-208.

[22]. Cavanna F, Ruggeri G, Iacobell C, Albertini A, Arosio P. Development of a monoclonal antibody against human heart ferritin and its application in an immunoradiometric assay. Clinica Chimica Acta. 1983; 134: 347-356.

[23]. Луньов ВЕ, Мельникова ЯИ, Кошкін СА, Луньова НМ. Моноклональні антитіла до феритину селезінки людини. Отримання і дослідження взаємодії з ферритином і апоферрітіном. Біохімія, 1993, том 58, вип. 5, 745-757.

[24]. Мельникова ЯИ, Луньов ВЕ, Прейгерзон ВА, Родіонов МА. Моноклональні антитіла до феритину селезінки людини. Локалізація епітопів і кількісні параметри зв'язування.Біохімія, 1993, том 58, вип. 5, 759-771.

[25] .Luxton AW, Walker WH, Gauldie J, Ali AM, and Pelletier C. A radioimmunoassay for serum ferritin. Clin. Chem. 1977; 23: 683-689.

[26]. Miles LE, Lipschitz DA, Bieber CP and Cook JD. Measurement of serum ferritin by a 2-site immunoradiometric assay. Analyt Biochem 1974, 61: 209-224.