Підготовка сперми для інсемінації

Підготовка сперми для інсемінації

Причин ненастання вагітності, на жаль, існує чимало. При виявленні у пари шийкового фактору безпліддя, при якому завагітніти не виходить через неможливість попадання достатньої кількості сперматозоїдів через шийку в порожнину матки, а також деяких видів несильно вираженого чоловічого фактора. ефективним рішенням є штучна інсемінація.

При внутрішньоматкової інсемінації, коли сперма вводиться через катетер прямо в порожнину матки, неприпустимо використання нативної (неочищеної) сперми. Обробка сперми для ВМІ обов'язкове. Це пояснюється кількома причинами. По-перше, в необробленість спермі містяться білки, чужорідні організму жінки і здатні викликати серйозну алергічну реакцію і навіть анафілактичний шок. По-друге, сперма може бути інфікована мікроорганізмами, здатними викликати запалення при попаданні в матку.

При природному заплідненні роль фільтра виконує цервікальний канал шийки матки, при проходженні через який сперма очищується від небажаних компонентів. При штучної інсемінації цю роль бере на себе ембріологічна або андрологічна лабораторія клініки, в якій проводиться ця процедура.

  1. — паркан еякуляту шляхом мастурбації або розморожування (якщо сперма була попередньо кріоконсервованих);
  2. — проведення аналізу сперми для оцінки її якості;
  3. — розрідження сперми, яке проводиться шляхом її інкубації при 37 ° С протягом 30 хвилин;
  4. — сама процедура очищення;
  5. — розведення отриманого концентрату з функціонально здорових сперматозоїдів живильним середовищем.

Перед ембріологом стоїть завдання очистити сперму від наступних компонентів:

— Насіннєва рідина — рідка частина еякуляту, що містить антигенні протеїни, які можуть викликати алергічну реакцію, і простагландини, які можуть спровоцціровать хворобливі скорочення матки при попаданні в її порожнину.

сторонні клітини — імунні та епітеліальні клітини, лейкоцити, незрілі гермінативні клітини, а також клітинні елементи.

Неактивні, пошкоджені, мертві і гинуть сперматозоїди. Розкладаються залишки таких сперміїв виділяють реактивний кисень,при великій концентрації негативно впливає на виживаність і функціональність сперматозоїдів. очищення сперми від них полегшує переміщення життєздатних сперматозоїдів при інсемінації, підвищує їх здатність зв'язуватися з мебраной яйцеклітини і проникати через неї.

Сперматозоїди з дефектами морфології хоча іноді і здатні запліднити яйцеклітину, але подальший розвиток таких ембріонів може зупинитися або порушитися.

інфекційні агенти — бактерії і віруси. Самі бактерії, прикріплений до поверхні сперматозоїдів, знижують їх рухливість і здатність до запліднення. Крім того, виділяються такими мікроорганізмами ендотоксини знижують виживання сперміїв. При попаданні в жіночі статеві шляхи бактерії і віруси здатні викликати запалення.

Крім очищення сперми від домішок необхідно домогтися найбільшої концентрації в живильному середовищі живих рухливих сперматозоїдів без патологій — тих, за допомогою яких запліднення найбільш ймовірно. При цьому підготовка повинна бути проведена з мінімальним пошкодженням чоловічих статевих клітин. При виборі техніки підготовки сперми застосовують індивідуальний підхід в залежності від її вихідних якостей.

На сьогоднішній день існує кілька методів обробки сперми для внутрішньоматкової інсемінації. У кожної з них є як переваги, так і недоліки.

  1. Метод флотації (спливання, swim-up)
  2. Цей метод заснований на тому, що рухливі сперматозоїди самостійно переміщаються вгору в промивають середовищі, яка наноситься на зразок сперми. Під час інкубації такого зразка активні сперматозоїди спливають з еякуляту в промивають середу, яка потім акуратно збирається для використання при інсемінації.
  3. Метод відносно простий і невимогливий до лабораторного обладнання та персоналу.
  4. Недоліком такої техніки є те, що з її допомогою не відсіваються сперматозоїди з поганою морфологією, бактерії і віруси.
  5. Витрати часу на процедуру — 1-1,5 години.
  1. Метод промивання сперми
  2. Це традиційний і нескладний метод обробки сперми для видалення рідкої її частини. При використанні цього методу сперму змішують з промивають середовищем і центрифугують. При цьому сперматозоїди опускаються до дна пробірки, утворюючи осад, який знову промивається за тією ж схемою кілька разів.
  3. Витрати часу на процедуру — менше години.
  1. Метод центрифугування в градієнті щільності
  2. Цей метод дозволяє відокремити життєздатні сперматозоїди від всіх інших компонентів сперми. При використанні цього методу в пробірку, в якій буде проходити очищення сперми, одна на іншу акуратно нашаровуються спеціальні колоїдні рідини з різною концентрацією. Зверху кладуть розведену сперму. Пробірку з таким "листковим пирогом" центрифугируют. При цьому найбільш рухливі сперматозоїди, осідаючи на дно пробірки і, проходячи через шари колоїдного розчину, очищаються від насіннєвої плазми, мертвих сперматозоїдів, сторонніх клітин і бактерій. Залишок рідини обережно забирається з пробірки, після чого осад переноситься в іншу пробірку і промивається для видалення залишків використаного розчину.
  3. Витрати часу на процедуру — від 20 хвилин до 1 години.
  1. метод фільтрації
  2. Цей метод використовується після попереднього промивання сперми в промивають середовищі шляхом центрифугування. Осад, отриманий після такого промивання, фільтрується через скловолокно під дією гравітації. Зібраний фільтрат використовують для внутрішньоматкової інсемінації.
  3. Витрати часу на процедуру — близько 10 хвилин.

Фахівець, який займається підготовкою сперми до інсемінації, вибирає серед доступних йому методів той, який зможе забезпечити оптимальний результат для конкретного зразка сперми. Ці ж методики використовуються для підготовки сперми в програмах ЕКЗ.

  1. пробна обробка еякуляту
  2. Якщо за результатами спермограми у лікаря-репродуктолога виникають сумніви, до якої репродуктивної технології вдатися — ВМІ, ЕКЗ або ІКСІ, можливе проведення пробної обробки сперми.

Так як позитивний результат проведення внутрішньоматкової інсемінації, як і будь-який інший процедури ДРТ, у великій мірі залежить від етапу підготовки сперми, репродуктивні клініки приділяють величезну увагу ефективності своїх лабораторій і професіоналізму займаються такою підготовкою співробітників.